期刊简介
本刊由中华预防医学会，广东省寄生虫学会主办，中山大学中山医院寄生虫学研究所，第一军医大学热带医学研究所，广东省寄生虫病防治研究所承办，编委会由全国及香港知名的寄生虫学，病原生物学，分子生物学等十余位专家组成，发行全国内各高校，研究机构及卫生医疗部门及港澳、台湾、英美地区。本刊专业论文起点高，质量优，印刷精美。
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首页>热带医学杂志
- 杂志名称：热带医学杂志
- 主管单位：广东省科学技术协会
- 主办单位：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
- 国际刊号：1672-3619
- 国内刊号：44-1503/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
Pf332抗原的结构和抗原表位的初步研究
单志新；余新炳；徐劲；吴忠道；李学荣；卞国武；马长玲；李焱；陈守义；胡旭初
关键词：恶性疟原虫, Pf332抗原, 分子克隆, 表达, 免疫, 序列分析
摘要：目的了解恶性疟原虫FCC1/HN株Pf332抗原(Ag332)的初级结构和潜在的抗原表位.方法根据Pf332基因已知序列,合成9对引物用于从恶性疟原虫FCC1/HN株基因组DNA 中扩增Pf332基因片段.将扩增得到的9个Pf332基因片段插入pMD-18T载体后测序.用DNAstar软件将测定的Pf332基因片段序列拼接出成完整的 Pf332基因序列.分别用SAPS、Tmpred、SingalP 和Blastn程序来分析Ag332的初级结构和序列同源性.将与Pf332基因的9595～10083、10339～10767 和10855～11247位碱基对应的R0 、R1和 R2片段分别插入真核表达载体pcDNA3-S.将pcDNA3-S-R0、pcDNA3 -S-R1 和pcDNA3-S-R2分别免疫Balb/c鼠,并通过免疫组化检测表达产物.通过ELISA 和体外疟原虫生长抑制实验来鉴定DNA免疫所诱导的保护性免疫反应.结果扩增到特异的9个Pf332基因片段,并正确插入pMD-18T载体.序列测定和拼接结果显示, 恶性疟原虫FCC1/HN株Pf332基因长16 377bp,编码5 458个氨基酸,相对分子质量约615.28 ku.Ag332包含17个高度简并的富谷氨酸重复序列,抗原中谷氨酸占30.18%.恶性疟原虫FC C1/HN株和3D7株Ag332的氨基酸残基同源性达94.55%.免疫组化检测显示R0、R1和R2在鼠肌肉组织中表达.分别免疫了pcDNA3-S-R0、pcDNA3-S-R1和pcDNA3-S-R2的实验组IgG含量显著大于空白对照组和pcDNA3组(P＜0.05).体外疟原虫生长抑制实验结果表明,pcDNA3-S-R0、pcDNA3-S-R1和pcDNA3-S-R2组的免疫血清在1:5稀释度时对恶性疟原虫的生长有抑制作用.结论 Pf332抗原是一包含很多高度简并的富谷氨酸重复序列的大蛋白,Pf332基因片段R1和R2编码潜在的抗原表位重复序列.
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