期刊简介
本刊由中华预防医学会，广东省寄生虫学会主办，中山大学中山医院寄生虫学研究所，第一军医大学热带医学研究所，广东省寄生虫病防治研究所承办，编委会由全国及香港知名的寄生虫学，病原生物学，分子生物学等十余位专家组成，发行全国内各高校，研究机构及卫生医疗部门及港澳、台湾、英美地区。本刊专业论文起点高，质量优，印刷精美。
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首页>热带医学杂志
- 杂志名称：热带医学杂志
- 主管单位：广东省科学技术协会
- 主办单位：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
- 国际刊号：1672-3619
- 国内刊号：44-1503/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
表达人血管内皮生长因子和血管生成素1的CHO细胞株的建立
单志新；林秋雄；余细勇；刘媛；郑猛；符永恒；谭虹虹；杨敏；林曙光
关键词：血管内皮生长因子, 血管生成素 1, 克隆, 分子, 基因表达
摘要：目的克隆人血管内皮生长因子( VEGF165)和血管生成素 1 (Ang 1)基因,建立可分别表达 VEGF165和 Ang 1的中国仓鼠卵巢细胞( CHO)株.方法用 PCR技术,分别从人心脏 cDNA文库中扩增 VEGF165和 Ang1 cDNA,并定向克隆入真核表达载体 pSecTag2B中.用 Lipofectamine2000将重组质粒转化入 CHO细胞中,用 Zeocin筛选并维持已转化重组质粒的 CHO细胞株.在大肠杆菌 DH10B中扩增转化入 CHO细胞中的重组质粒,行 DNA测序鉴定.用 Western-blot鉴定 CHO细胞中重组 VEGF165和 Ang 1的表达.结果从人心脏 cDNA文库中扩增出 VEGF165和 Ang1 cDNA片段,酶切和测序结果显示,已正确构建重组质粒 pSecTag-VEGF165和 pSecTag-Ang1. 用 Zeocin筛选到候选的 CHO细胞株, DNA测序结果表明, pSecTag-VEGF165和 pSecTag-Ang1已分别成功转化入 CHO细胞中. Western-blot结果显示,在 CHO细胞中表达出可被 VEGF和 Ang 1单抗识别的特异蛋白.结论克隆了 VEGF165和 Ang 1基因,并建立了表达 VEGF165和 Ang 1的 CHO细胞株.
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