期刊简介
本刊由中华预防医学会，广东省寄生虫学会主办，中山大学中山医院寄生虫学研究所，第一军医大学热带医学研究所，广东省寄生虫病防治研究所承办，编委会由全国及香港知名的寄生虫学，病原生物学，分子生物学等十余位专家组成，发行全国内各高校，研究机构及卫生医疗部门及港澳、台湾、英美地区。本刊专业论文起点高，质量优，印刷精美。
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- 杂志名称：热带医学杂志
- 主管单位：广东省科学技术协会
- 主办单位：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
- 国际刊号：1672-3619
- 国内刊号：44-1503/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
一种广州管圆线虫新基因——胶原蛋白全长cDNA的克隆和鉴定
王琼；吴焜；陈晓光；郝丽
关键词：广州管圆线虫, 胶原蛋白, cDNA, 原核表达
摘要：目的 克隆和鉴定广州管圆线虫(Angiostrongylus cantonensis)新基因--胶原蛋白(collagen,COL)全长cDNA序列.方法 根据表达序列标签(expression sequence tag,EST)中部分序列和文库载体序列设计引物,采用PCR技术从广州管圆线虫幼虫的cDNA文库中分段扩增cDNA序列,用DNAMAN软件拼接分段扩增的序列以得到全长cDNA序列:利用多种生物信息学软件对cDNA全长序列进行同源性搜索与结构分析.根据cDNA全长序列,设计新的引物从文库中扩出包含胶原蛋白全长开放阅读框(open readingframe,ORF)的cDNA片段,PCR产物纯化后克隆到pMD18-T载体上并测序.重组T载体经双酶切后切下的新基因AcCOL亚克隆到原核表达质粒pET32a(+)中.结果 克隆一个广州管圆线虫新基因全长cDNA序列;序列比对、蛋白结构域搜索及结构分析结果显示,该新基因所编码的是一种胶原蛋白.构建的新基因重组质粒经双酶切后证明含有与目的片段长度相符的插入片段.结论 克隆并鉴定了广州管圆线虫新胶原蛋白编码基因全长,成功构建了该基因的原核表达重组质粒pET32a(+)-AcCOL.
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