期刊简介
本刊由中华预防医学会，广东省寄生虫学会主办，中山大学中山医院寄生虫学研究所，第一军医大学热带医学研究所，广东省寄生虫病防治研究所承办，编委会由全国及香港知名的寄生虫学，病原生物学，分子生物学等十余位专家组成，发行全国内各高校，研究机构及卫生医疗部门及港澳、台湾、英美地区。本刊专业论文起点高，质量优，印刷精美。
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首页>热带医学杂志
- 杂志名称：热带医学杂志
- 主管单位：广东省科学技术协会
- 主办单位：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
- 国际刊号：1672-3619
- 国内刊号：44-1503/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
半固体培养基法制备单抗的可行性研究
刘帆；王萍；魏威；李珍；朱勇；董文其
关键词：杂交瘤, 甲基纤维素半同体培养基, 克隆
摘要：目的 建立稳定的甲基纤维素半固体培养基一步法筛选和克隆化杂交瘤细胞的方法.方法 常规细胞融合后,用甲基纤维素半固体培养基重悬细胞沉淀,通过优化甲基纤维素半固体培养基中甲基纤维素、血清及L-谷氨酰胺三种成分的浓度,建立稳定高效的杂交瘤细胞克隆化方法 .并进行有限稀释法和甲基纤维素半同体培养基法筛选杂交瘤细胞的对照实验.阳性克隆扩大培养,ELISA检测后冻存,再次复苏后ELISA检测呈阳性为稳定杂交瘤细胞株.结果 甲基纤维素三种浓度中,甲基纤维素浓度1.0%和1.2%时获得的杂交瘤细胞团个数约为甲基纤维素浓度1.25%时的2倍.而甲基纤维素浓度1.2%时细胞团固定效果较甲基纤维素浓度1.0%更好.通过对梯度稀释的SP 2/0细胞培养后,选择半固体培养基中使用的胎牛血清浓度(25%),在半固体培养基中含4 mmol/L L-谷氨酰胺比含2 mmol/L L-谷氨酰胺得到多近一倍的杂交瘤.得到的5株阳性杂交瘤在扩大培养、冻存复苏后抗体分泌稳定,得到5株稳定阳性杂交瘤细胞株.有限稀释法和甲基纤维素半固体培养基法筛选杂交瘤细胞对照实验显示半同体培养基法可节省一半时间.结论 建立了稳定的甲基纤维素半固体培养基一步法筛选和克隆化杂交瘤细胞的方法 .该法缩短了克隆化的时间,节省了人力和材料,不需要添加饲养细胞和细胞因子,是一种稳定高效的杂交瘤细胞克隆化方法.
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