期刊简介
本刊由中华预防医学会，广东省寄生虫学会主办，中山大学中山医院寄生虫学研究所，第一军医大学热带医学研究所，广东省寄生虫病防治研究所承办，编委会由全国及香港知名的寄生虫学，病原生物学，分子生物学等十余位专家组成，发行全国内各高校，研究机构及卫生医疗部门及港澳、台湾、英美地区。本刊专业论文起点高，质量优，印刷精美。
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- 杂志名称：热带医学杂志
- 主管单位：广东省科学技术协会
- 主办单位：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
- 国际刊号：1672-3619
- 国内刊号：44-1503/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
2009H1N1流感病毒神经氨酸酶基因克隆与表达
张玲；魏绍静；肖春花；钟剑波；陈伟烈；张复春
关键词：2009 H1N1病毒, MDCK细胞, 神经氨酸酶, 原核表达
摘要：目的 制备2009 H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)重组蛋白,为建立H1N1快速检测方法 和神经氨酸酶抑制剂筛选模型奠定基础.方法 采用MDCK细胞方法 分离2009 H1N1流感病毒,提取病毒RNA,RT-PCR生成NA基因,构建原核表达载体PET- 102/D-TOPO-NA,IPTG诱导表达重组蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳、Werstern Blotting鉴定重组蛋白.结果 成功分离2009H1N1流感病毒,NA蛋白119、152、275、292位氨基酸分别为Glu、Arg、His和Cys.SDS-PAGE凝胶电泳蛋白分子相对分子质量约为64 000,与预期一致.Western Blotting证实该蛋白具有神经氨酸酶抗原活性.结论 IPTG诱导原核表达神经氨酸蛋白的适浓度为0.1 mmol/L.实验得到的蛋白尚需进一步纯化.
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