期刊简介
本刊由中华预防医学会,广东省寄生虫学会主办,中山大学中山医院寄生虫学研究所,第一军医大学热带医学研究所,广东省寄生虫病防治研究所承办,编委会由全国及香港知名的寄生虫学,病原生物学,分子生物学等十余位专家组成,发行全国内各高校,研究机构及卫生医疗部门及港澳、台湾、英美地区。本刊专业论文起点高,质量优,印刷精美。
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- 杂志名称:热带医学杂志
- 主管单位:广东省科学技术协会
- 主办单位:广东省寄生虫学会 中华预防医学会
- 国际刊号:1672-3619
- 国内刊号:44-1503/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:Caj-cd规范获奖期刊期刊收录:国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
人微小RNA-16(miR-16)重组腺病毒的制备和鉴定
刘居理;林秋雄;邓春玉;朱杰宁;麦丽萍;余细勇;单志新
关键词:miR-16, 载体构建, 腺病毒, 骨髓间充质干细胞, 表达
摘要:目的 制备人微小RNA-16(miR-16)重组腺病毒,研究其在人骨髓间充质于细胞(hMSCS)中的表达及对细胞周期素依赖蛋白激酶6(CDK6)表达的影响.方法 从人基因组DNA中扩增miR-16前体的DNA,定向插人腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV.将经Pme I线性化的重组穿梭载体pAdTrack-CMV-miR-16与腺病毒骨架质粒pAdEasy- I共转化感受态大肠杆菌BJ5183,在细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒rAdTrack-miR-16.将经Pac I线性化的rAdTrack-miR-16在人胚肾293细胞(HEK293 )中包装并扩增出miR-16的重组腺病毒rAd-miR-16.将重组腺病毒感染hMSCs,分别检测miR-16前体和miR-16靶基因CDK6的表达.结果 pAdTrack-CMV-miR-16构建正确,在HEK293细胞中成功包装并扩增出重组腺病毒rAd-miR-16.rAd-miR-16感染的hMSCs中miR-16前体水平显著升高(P<0.05),CDK6mRNA的表达降低不明显,CDK6蛋白表达水平显著降低(P<0.01).结论 成功制备了表达人miR-16的重组腺病毒,并能有效介导 miR-16在hMSCs中的表达,为进行miR-16的功能研究创造了条件.
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