期刊简介
本刊由中华预防医学会，广东省寄生虫学会主办，中山大学中山医院寄生虫学研究所，第一军医大学热带医学研究所，广东省寄生虫病防治研究所承办，编委会由全国及香港知名的寄生虫学，病原生物学，分子生物学等十余位专家组成，发行全国内各高校，研究机构及卫生医疗部门及港澳、台湾、英美地区。本刊专业论文起点高，质量优，印刷精美。
往期目录
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
-
2019
首页>热带医学杂志
- 杂志名称：热带医学杂志
- 主管单位：广东省科学技术协会
- 主办单位：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
- 国际刊号：1672-3619
- 国内刊号：44-1503/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
具有抗血管新生活性的K5突变体GST-K5M5基因的构建、表达及纯化
黄莉钧；石丁波；姚亚超；李磊；戴智育；张婷；高国全；杨霞
关键词：K5突变体, 融合蛋白GST-K5M5, 自动诱导培养, 水溶性, 冻干粉
摘要：目的 构建可溶性的人纤溶酶原Kringle 5(K5)突变体GST-K5M5基因,并在单位体积的原核系统中获得高表达、高纯度、可水溶的融合GST-K5M5蛋白粉针剂.方法 K5M5突变体基因(模板已经对K5 N端5个带负电的酸性氨基酸进行中性氨基酸丝氨酸的中性突变),通过PCR从本实验室保存的pET22b (+)/K5mut5 cDNA模板中扩增得到,再克隆到pGEX-4T-1/BL21 (DE3)原核表达系统中.用自动诱导培养系统诱导其表达,提高产量.通过GST树脂亲和层析柱分离,双蒸水透析纯化,再制成冻干粉剂保存.结果 该重组GST-K5M5蛋白的分子量为37 000Mr,通过SDS-PAGE和Western-blot可以检测到其存在.冻干粉复溶的GST-K5M5呈剂量依赖抑制内皮细胞的增殖.结论 在以前的研究基础上设计并用自动诱导培养的方法在大肠杆菌中表达纯化出了GST-K5M5融合蛋白,得到的GST-K5M5蛋白产量高、纯度高、可溶性好、生物学效应强,且方法简便、经济,为工业大规模发酵提供了基本参数.
友情链接