期刊简介

               本刊由中华预防医学会,广东省寄生虫学会主办,中山大学中山医院寄生虫学研究所,第一军医大学热带医学研究所,广东省寄生虫病防治研究所承办,编委会由全国及香港知名的寄生虫学,病原生物学,分子生物学等十余位专家组成,发行全国内各高校,研究机构及卫生医疗部门及港澳、台湾、英美地区。本刊专业论文起点高,质量优,印刷精美。                

首页>热带医学杂志
  • 杂志名称:热带医学杂志
  • 主管单位:广东省科学技术协会
  • 主办单位:广东省寄生虫学会 中华预防医学会
  • 国际刊号:1672-3619
  • 国内刊号:44-1503/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:Caj-cd规范获奖期刊期刊收录:国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
热带医学杂志2013年第01期

利用荧光素酶报告基因在体观察移植的人胚胎干细胞的动向

蔡柳洪;张滨;陈世钦;曾敏慧;陶欣

关键词:荧光素酶报告基因, 慢病毒载体, 人胚胎干细胞
摘要:目的 利用慢病毒载体携带荧光素酶报告基因并转导人胚胎干细胞,以实现在体观察移植细胞的增殖情况.方法 酶切pGL3 base质粒获得荧光素酶基因序列,酶切LTBR-GIP获得载体骨架,经过酶切产物热失活、平末端处理、CIP处理、胶纯化和连接,所构建慢病毒载体命名为ULIP,包括UBC启动子和IRES连接,能同时表达荧光素酶基因和Puromycin抗性基因.以ULIP转导人胚胎干细胞H9,并以Puromycin筛选稳定转导的细胞.随后移植于BALB/c小鼠和RAG-/-γC-/-小鼠,在Xenogen IVIS (r)50成像系统进行荧光信号检测.结果 稳定转导ULIP或LTBR-GIP的H9移植到BALB/c小鼠,ULIP组3d后荧光信号明显减弱,5d后基本上不能检出.而移植到RAG-/-yC-/-小鼠后,ULIP组的荧光信号在第3天稍有下降,随后荧光信号逐渐增强.LTBR-GIP-H9在移植BALB/c小鼠和RAG-/-yC-/-小鼠后均未能检测到荧光信号.结论 荧光素酶报告基因可以用于观察移植细胞在体内的动向,实现实时观察移植细胞的存活情况.