期刊简介
本刊由中华预防医学会，广东省寄生虫学会主办，中山大学中山医院寄生虫学研究所，第一军医大学热带医学研究所，广东省寄生虫病防治研究所承办，编委会由全国及香港知名的寄生虫学，病原生物学，分子生物学等十余位专家组成，发行全国内各高校，研究机构及卫生医疗部门及港澳、台湾、英美地区。本刊专业论文起点高，质量优，印刷精美。
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首页>热带医学杂志
- 杂志名称：热带医学杂志
- 主管单位：广东省科学技术协会
- 主办单位：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
- 国际刊号：1672-3619
- 国内刊号：44-1503/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
α变形菌纲磁螺菌属TaqMan探针实时荧光定量PCR快速检测方法的建立
周旋；张宝；张文炳；王裴；曹虹；赵卫
关键词：趋磁细菌, α变形菌纲磁螺菌属, TaqMan探针, 16SrRNA基因
摘要：目的 建立一种快速有效检测环境中α变形菌纲磁螺菌属细菌的方法.方法 本研究以α变形菌纲磁螺菌属保守且特异的16SrRNA片段为靶序列,化学合成基因序列,制备重组质粒作为磁螺菌属检测的标准品;用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术,针对目的片段基因设计特异性引物和TaqMan荧光探针,进行实时荧光定量PCR检测,运用统计学方法评价该方法的特异性、敏感性及重复性.结果 本实验成功构建了质粒PUC19-QC,引物、探针特异性良好,标准曲线在5.10×10～15.10xl07拷贝数之间具有较好的线性关系,相关系数R2=0.999.该法低可检测到5.10x 10个DNA拷贝数,灵敏度明显高于普通PCR;重复性试验表明,荧光定量PCR检测结果Ct值波动范围较小,Ct值的标准差均小于0.23,表明该法重复性好,可靠性高.析因方差分析表明不同稀释度之间的Ct值差异有统计学意义(F=3 125.305,P＜0.001),三个批次的再现性良好,差异无统计学意义(F=0.057,P=0.945),而浓度分组与时间之间也无交叉效应(F=0.533,P=0.873).结论 本实验所建立的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测技术,能够快速有效地检测α变形菌纲磁螺菌属细菌,且检测结果稳定,受外界条件如时间、气温等影响小.
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