期刊简介
本刊由中华预防医学会，广东省寄生虫学会主办，中山大学中山医院寄生虫学研究所，第一军医大学热带医学研究所，广东省寄生虫病防治研究所承办，编委会由全国及香港知名的寄生虫学，病原生物学，分子生物学等十余位专家组成，发行全国内各高校，研究机构及卫生医疗部门及港澳、台湾、英美地区。本刊专业论文起点高，质量优，印刷精美。
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- 杂志名称：热带医学杂志
- 主管单位：广东省科学技术协会
- 主办单位：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
- 国际刊号：1672-3619
- 国内刊号：44-1503/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
三种方法提取金黄色葡萄球菌DNA的比较
葛婧；钟雪珊；肖刚；陈佑明；陈清
关键词：金黄色葡萄球菌, DNA提取, 核酸
摘要：目的：对三种金黄色葡萄球菌DNA提取方法的效果进行比较，以期获得一种简便、经济的提取方法。方法采用改良SDS法、NP40法和细菌DNA试剂盒法分别提取同一浓度的金黄色葡萄球菌ATCC25923细菌DNA，利用NanoDrop 2000核酸检测仪测定核酸浓度和纯度，纯度用核酸在波长260 nm处的吸光值与在波长280 nm处的吸光值的比值A260／A280表示，用1％琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量；提取不同浓度梯度的金黄色葡萄球菌 ATCC25923细菌DNA，PCR扩增16S rDNA片段检测并比较三种方法的灵敏度。结果三种方法提取金黄色葡萄球菌所得核酸浓度差异有统计学意义（χ2＝6．25，P＜0．05），NP40法提取浓度较高，改良SDS法较低。试剂盒法提取的DNA纯度较高， A260／A280值在1．8～2．0之间；NP40法提取纯度较差；DNA电泳结果表明SDS法和TIANGEN试剂盒法提取的DNA条带清晰，无拖带现象，NP40法未出现DNA主带，且有拖带现象。所有方法所得DNA经PCR扩增均出现阳性条带。NP40法提取DNA的PCR检测敏感度高，为1．5×106 cfu／ml，改良SDS法敏感度低，为1．5×108 cfu／ml。结论 NP40法提取DNA成本低，耗时少，灵敏度高，适用于金黄色葡萄球菌的快速初筛。
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