期刊简介
本刊由中华预防医学会，广东省寄生虫学会主办，中山大学中山医院寄生虫学研究所，第一军医大学热带医学研究所，广东省寄生虫病防治研究所承办，编委会由全国及香港知名的寄生虫学，病原生物学，分子生物学等十余位专家组成，发行全国内各高校，研究机构及卫生医疗部门及港澳、台湾、英美地区。本刊专业论文起点高，质量优，印刷精美。
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首页>热带医学杂志
- 杂志名称：热带医学杂志
- 主管单位：广东省科学技术协会
- 主办单位：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
- 国际刊号：1672-3619
- 国内刊号：44-1503/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
草鱼呼肠孤病毒HZ08株外衣壳蛋白VP4的节段克隆表达和免疫学分析
任鹏丽；陈庭金；黄艳；曾伟伟；余新炳
关键词：GCRV HZ08, VP4, 原核表达
摘要：目的 原核表达草鱼呼肠孤病毒(GCRV)HZ08株S6基因特定保守区域编码的外衣壳蛋白VP4并探究其免疫原性,为草鱼出血病(GCHD)防治提供新思路.方法 将VP4基因特定保守区域克隆到原核表达质粒pET-32a(+)中,诱导表达并用镍柱进行纯化,用纯化的目的蛋白免疫SD大鼠获取免疫血清;应用ELISA检测实验组(重组蛋白皮下免疫大鼠)和对照组(PBS免疫大鼠)血清IgG抗体滴度及亚类的水平;应用间接免疫荧光实验(IFA)检测rVP4抗血清对病毒的识别情况.结果 PCR、双酶切及DNA测序结果均表明pET32a-VP4重组质粒构建成功;SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠杆菌BL21/DE3中获得高效表达,融合蛋白分子量约为43 kDa,且在37℃、1mmol/L IPTG条件下诱导表达效果优;经亲和层析获得了高纯度蛋白;免疫大鼠6周后血清IgG抗体滴度高达1:819 200,IgG1、IgG2a水平差异无统计学意义(P＞0.05);IFA结果显示抗血清组特异性荧光显著,而对照组未见荧光.结论 GCRV-HZ08 VP4具有良好的免疫原性,可诱导大鼠产生Th1/Th2混合型免疫反应,且rVP4抗血清可识别该病毒,为VP4作为疫苗候选分子提供了依据.
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